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外泌体蛋白糖基化原位可视化和生物学功能研究方法
【来源】: 【发表时间】:2021-7-19 【浏览次数】:

近日,我系杨朝勇教授课题组在外泌体蛋白糖基化检测及功能研究领域取得新进展,相关成果以" Coupling Aptamer-based Protein Tagging with Metabolic Glycan Labeling for In Situ Visualization and Biological Function Study of Exosomal Protein-Specific Glycosylation"为题,发表于《德国应用9455澳门新葡萄娱乐场大厅》(DOI: 10.1002/anie.202103696)。

外泌体糖蛋白在众多生理和病理过程中起着重要作用。然而,现有的外泌体蛋白糖基化的研究方法需将外泌体中的蛋白分离,操作繁琐,且影响外泌体的完整性,不适用于外泌体蛋白糖基化的功能研究。因此迫切需要开发一种高效、非侵入的策略用于外泌体蛋白糖基化检测,并进一步探讨其生物学意义。

针对此问题,杨朝勇教授课题组发展了一种基于糖代谢标记和核酸适体识别的外泌体蛋白糖基化原位可视化成像策略。具体而言,利用非天然的唾液酸代谢前体Ac4ManNz对外泌体表面的唾液酸进行糖代谢标记,通过炔基染料DBCO-Cy5与唾液酸上叠氮的无铜叠氮-炔烃环加成反应将外泌体表面的唾液酸标记。同时使用Cy3标记的PD-L1适体特异性识别PD-L1蛋白,并通过Cy3Cy5之间的荧光共振能量转移实现外泌体PD-L1糖基化原位成像。运用该策略实现了外泌体PD-L1糖基化原位成像,并首次证实外泌体PD-L1的糖基化是外泌体PD-L1PD-1识别的结构基础,且有助于抑制CD8+T细胞的增殖。综上所述,该策略提供了一种高效、非侵入的外泌体蛋白糖基化检测及生物学功能研究方法,是糖蛋白组学研究的有利工具。

该研究工作为我系杨朝勇教授、宋彦龄教授共同指导完成。我系2018级博士生朱琳为论文第一作者。该研究工作得到国家自然科学基金项目(22022409217350042187408921705024)等资助。

论文链接:https://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/anie.202103696